在产品制造过程中，作为工艺的一部分，通常会在上游添加许多化学品，以改善产品表达和回收。这些化学物质在下游纯化过程中几乎完全被去除；然而，这些制剂的残留水平可能会保留在原料药和药品中。为了确保这些制剂的水平在安全数量内，需要使用高灵敏度的分析方法来检测和定量这些残留。
除了工艺残留外，与产品相关的杂质也有可能被带入制造和纯化过程。这些杂质，包括宿主细胞蛋白、宿主细胞 DNA、N-端截断和其他潜在修饰，可能会在动物和人类中引起不良反应，因此，必须使用检测来确保存在的任何杂质低于预先确定的可接受水平。
| 残留 | 方法说明 | LOQ (ppm)1 | LOD (ppm)1 |
|---|---|---|---|
| IPTG | HPLC with ELSD/CAD | 6 | < 1 |
| PEI | HPLC with ELSD/Fluorescence | 10/< 2 | 1-2/< 0.5 |
| 卡那霉素 | HPLC with UV/Vis | 0.03 | < 0.01 |
| 消泡剂 | HPLC with ELSD/CAD | 1 | 0.1 |
| TFA/醋酸盐 | HPLC with UV/Vis | 1 | 0.1 |
| 氰酸盐 | HPLC with Conductivity/ECD | 0.6 | 0.1 |
| 咪唑 | HPLC with Fluorescence | 0.13 | < 0.1 |
| Triton X-100 | HPLC with ELSD/CAD | 5 | 1 |
| 聚山梨醇酯（吐温）20/80 | HPLC with ELSD/CAD | 5 | 1 |
| 两性洗涤剂 | HPLC with ELSD/CAD | 1-5 | < 1 |
| Pluronic | HPLC with ELSD/CAD | 1-5 | < 1 |
| Protein A | ELISA | 0.001-0.10 | < 0.001 |
| PEG | HPLC with ELSD/CAD | 1-10 | < 0.5 |
| TRIS | HPLC | 1-10 | < 0.5 |
| 生长因子（例如胰岛素、干扰素） | ELISA | 0.001-0.10 | < 0.001 |
| 杂质 | 方法说明 | LOQ (ppm) | LOD (ppm) |
|---|---|---|---|
| 宿主细胞蛋白 (HCP) | 商业试剂盒或定制化验 | 0.001-0.010 | < 0.001 |
| N-端截断 | N-端测序 | > 10% | |
| 宿主细胞 DNA | PCR | 方法-和产品相关- | |
| 氧化/脱酰胺 (PTM) | 肽图分析 LC-MS 或 LC-MS/MS、IsoQuant HPLC | 方法-和产品相关- | |
| 异构体分析 | 离子交换 HPLC、cIEF、唾液酸分析 | 方法-和产品相关- | |
| 二硫键加扰（错误折叠）；构象杂质 | 肽图分析 LC-MS 或 LC-MS/MS、Ellman 游离巯基、内在色氨酸荧光、ANS 染料结合、NMR | 方法-和产品相关- | |
| C-端完整性 | 肽图分析 LC-MS 或 LC-MS/MS | 方法-和产品相关- | |
| 聚合 | 分析型超速离心 (AUC)、SEC/SEC-MALLS、动态光散射 (DLS) | 方法-和产品相关- | |
